PRODUKSI MIKOENZIM JAMUR ENTHOMOPATOGEN Verticillium lecanii SEBAGAI PENGHIDROLISIS KUTIKULA SERANGGA HAMA

Oleh: Joko Ariswanto, SP. 

(Jurusan Hama dan Penyakit Tumbuhan-Universitas Brawijaya) 

Serangga merupakan hewan yang paling besar berperan sebagai hama tanaman. Berbagai metode pengendalian serangga hama telah banyak dilakukan salah satunya penggunaan pestisida kimia, namun pengendalian tersebut dirasa kurang efektif dalam mengendalikan serangga hama. Hal tersebut dikarenakan sebagian besar serangga memiliki lapisan kulit luar atau kutikula yang tebal dan tersusun atas lapisan kitin dan lemak sehingga bahan aktif pestisida tidak dapat menembus kutikula serangga. Kitin merupakan komponen polysakarida yang tersusun atas monomer β-1,4 N-acetyl-D-glucosamine yang mudah terhidrolisis secara biologis, selain pada serangga kitin juga terdapat pada cangkang crustacea dan dinding sel jamur (Matsumoto et al., 2004). Penggunaan enzim penghidrolisis kitin merupakan cara yang dapat dilakukan dalam usaha pengendalian serangga hama secara alami. Kitinase merupakan enzim yang dihasilkan oleh mikroorganisme seperti jamur dan bakteri yang dapat menghidrolisis lapisan kitin pada subtrat tumbuh (Patil et al., 2000).

Jamur enthomopatogen Verticillium lecanii merupakan salah satu jamur yang dapat memproduksi enzim hidrolisis yakni enzim kintinase, lipase dan protease (Leger et al., 1997). Jamur V.lecanii termasuk dalam klas:Deuteromycetina, Ordo:Moniliales, famili: Moniliaceae, Genus: Verticillium dan Spesies :Verticillium lecanii (Clements dan Shear, 1975). Proses infeksi serangga oleh jamur diperantarai oleh enzim hidrolase kutikula yakni enzim kintinase, lipase dan protease. Selama proses infeksi jamur, jamur akan mengsekresikan enzime hidrolitik yang membantu dalam proses kolonisasi jamur pada intergumen serangga inang. Enzim protease dan karbohidratase akan disekresikan untuk menghidrolisis dinding sel serangga (Hasan et al., 2013).Jamur akan masuk kedalam intergumen serangga secara mekanis dengan menggunakan hifa, setelah masuk kedalam tubuh serangga jamur akan membentuk apresorium atau tabung kecambah. Jamur dalam tubuh serangga akan memproduksi enzime lipolitik yang terdiri dari endokitinase (polimer β-N-acetylhexosaminidase) dan extokitinase. Polimer β-N-acetylhexosaminidase adalah komponen yang penyusun kitinase yang terdiri atas monomer-monomer diacetylchitobiose atau chitotriose dan N-acetyl glucosamine atau chitotetraose. Enzim ini berperan dalam penyerapan nutrisi pada substrat serangga untuk pertumbuhan jamur. (Hasan et al., 2013; Sahai dan Manocha, 1993). Efektitifitas penggunaan jamur V. Lecanii terbukti dapat mengendalikan hama wereng batang hijau dengan jalan mempengaruhi kepiridian serangga hama dan dapat mematikan hama kutu daun hingga 100% (Ladja et al., 2011; Burges, 1980). 

Jamur enthomophatogen V. Lecanii: a-b. Serangga terinfeksi jamur V. Lecanii; c-d. Kenampakan mikroskopis miselium jamur V. Lecanii dan f. Konidia jamur V. Lecanii 

(Sumber: http://www.bcrc.firdi.org.tw/fungi/fungal_detail.jsp?id=FU200802290019)

Perbanyakan jamur V.lecanii mengacu pada hasil penelitian Yadav et al. (2013), jamur V.lecanii diisolasi dari tanah dengan menggunakan metode delution plate dan dibiakan pada media MEA (Malt Ekstrak Agar).  kemudian diinkubasi selama 4 hari. Penggunaan media biakan MEA lebih cocok bagi pertumbuhan hifa jamur V.lecanii daripada media PDA (Pottato Dextrose Agar) dan mempersingkat masa inkubasi. Koloni jamur yang tumbuh akan dilakukan purinifikasi hingga didapatkan koloni murni jamur. Koloni murni jamur V.lecanii akan dibiakan masal dengan menggunakan media media cair ME (Malt Ekstrak). Komposisi bahan pembuat media ME sebagai berikut: Malt (30 gram), Peptone (5 gram), dan aquades (1000 ml) dengan pH media 7. Koloni jamur V.lecanii dimasukan dalam media cair dan dipasang aerator hingga kerapatan jamur bertambah. Aplikasi jamur V.lecanii dilakukan dengan cara mengencerkan suspensi jamur dengan kerapatan 10⁸ spora/ml kemudian larutan disemprotkan pada serangga target (Ladja et al., 2011).

 [JK06].